Mikä vaikutukset eivät Dimeerit Olla Experimental moolimassa ?

Dimer tuleekreikan ” kahteen osaan . ” Kutennimikin kertoo , dimeerit ovat paria molekyylejä, jotka liittyvät yhteen muodostaakseensuurempaa kokonaisuutta . Joissakin tapauksissa nämä kaksi alayksikköä on todella liittyneet kovalenttisesti niin, että ne muodostavat yhden molekyylin ; useammin kuitenkinväliset sidoksetkahden alayksikön ovat heikkoja -kovalenttisten joukkovelkakirjoja . Tapauksissa , kuten nämä , dimeerit voi vaikuttaa siihen, miten voit laskea moolimassa —massa yksi mooli molekyylejäyhdiste. Tyypit
p Jos kahden alayksikön dimeerin ovat kovalenttisesti sitoutuneet, niillä ei ole vaikutusta siihen, miten te kokeellisesti määrittää molekyyli- massa , koska niistä on tullut yksi molekyyli . Haluat löytäämassa yksi mooli molekyylejäyhdiste , ja koskadimeeri onyhdiste ei ole näkökohtia täällä , joita ei tavallisesti sovelleta . Biokemistejä kuitenkin usein käsitellä proteiineja, jotka muodostavat dimeerejä , jotka on heikosti yhdistetty toisiinsa ei-kovalenttisin joukkovelkakirjoja , ja nämä ovathieman mielenkiintoisemman .
Dissosiaatio
p Jos voit laskettumoolimassaproteiinin dimeeriä , tuloksesi riippuu siitä katsoittemassa dimeerin tai sen alayksiköitä . Homodimeeri valmistettu kahdesta identtisestä alayksiköstä , esimerkiksi olisimoolimassa kaksi kertaa suurempi kuin joko alayksikkö . Heterodimeeri valmistettu epäidenttiseen alayksikköä sen sijaan onhieman erilainen , koska kukinkahden alayksikön on yleensäerilainen moolimassa .
Lämmitys

Lämmitys proteiini dimeereistä yleensä saa heidät erottaa . Tyypillisesti se on myös denaturoidaproteiineja ja aiheuttaa heille menettävät muotonsa . Jos kahden alayksikön ovat yhteydessä toisiinsasellainen kovalenttinen sidos kutsutaandisulfidisilta , käsittelemällä niitä merkaptoetanolia rikkoo disulfidisidos vapauttaaalayksiköt . Biochemists tavallisesti lämmön proteiineja ja lisää merkaptoetanolin ennen suorittaamenettelyä kutsutaanWestern blot , joten nämä kaksi vaihetta auttaa varmistamaanproteiinit ovat kokonaan denaturoitua .
Massaspekrometria

Massaspektrometria onhyvin tarkka tapa määrittää moolimassan proteiinien ja muiden molekyylien kanssa. Höyrystämällä proteiinien samalla tavalla kuin muita yhdisteitä höyrystetään massaspektrometriaa mahdollisesti hajottamatta niitä , kuitenkin niin, massaspektrometriaa proteiinien tyypillisesti perustuu jokosähkösumutus -taimatriisi – laserdesorptio ( MALDI ) tekniikoita sijaan. Nämä tekniikat voivat aiheuttaa dimeereiksi irtoavan , vaikka joskus dimeerit voi myös muodostaa prosessin aikana , ja tutkijat on otettava nämä mahdollisuudet huomioon tulkittaessa tietonsa .

Vastaa