Western blot ,analyysimenetelmiä käytetään paikantamaantiettyyn proteiiniin Tietyssä erässä , työllistääkykyentsyymi tai fluoresenssileimattuja ensisijainen vasta-aineen sitoutumisen sen antigeeni . Se on kolmivaiheinen prosessi, joka alkaa geelielektroforeesilla , minkä jälkeen kalvo -blottauksella ja vasta-aineilla . Proteiini havaitseminen voi olla suora tai epäsuora , joista jälkimmäinen käyttäenleimattua sekundaarista vasta suunnattuensisijaisesti . Vaikka hyväksyttyrutiini proteiini analyysimenetelmä, western blot on rajoituksia sekä hyötyjä . Advantage : Herkkyys
Yksi suurimmista argumentteja Western blot on sen herkkyys . Koska sen kyky havaita jopa vain 0,1 ng proteiinia näytteessä ,tekniikka voi teoriassa olla tehokas varhainen diagnostinen työkalu , tunnistava pienintäkään Immunogeeninen vastaustavirus tai bakteeri potilasnäytteen . Epäsuora Western blot edelleen perustuu tähän herkkyyttäsekundaarinen vasta-aineen kykyä monistaasignaalin intensiteetti havaitaankuvantamisjärjestelmä . Suurempi herkkyys tarkoittaa, että vähemmän vasta-aineita tarvitaan testauksessa , joka supistetaan laboratorion kustannuksia merkittävästi .
Advantage : erityisyys
< p >western blot tekniikalla velkaa sen erityispiirteet kaksi suurta myötävaikuttavat tekijöistä. Ensinnäkin geelielektroforeesia lajitteleenäytettä proteiineja erikokoisia , maksu , että näyttelyissä . Tämä prosessi itsessään on suuri askel kohti havaitsemiseen , kuten bändejä , jotka on muodostettu geeli jo antaa vihjeitä proteiinin koko tai kiinnostava polypeptidi . Spesifisyydenvasta-aine -antigeeni- vuorovaikutusta toimii toisena iso tekijä . Koska spesifisten vasta-aineiden affiniteettia tiettyjen proteiinien , prosessi voi selektiivisesti havaitakohdeproteiinin vaikkaseos 300000 eri proteiineja .
Haitta: taipuvat epätosi tai Subjektiivinen Tulokset