polymeraasiketjureaktio , tai PCR , on tekniikka, molekyylibiologian monistamiseen käytettiin tiettyjen alueiden DNA: ta. PCR on riippuvainen alukkeita , jotka ovat lyhyitä DNA-säiettä , jotka ovat toisiaan täydentäviä ja spesifisiäDNA: lla . Vaikka alukkeet yleensä sitoutuvat DNA Matching niiden järjestys , he joskus sitoutuvat ja vahvistavat toisiaan , mikä aiheuttaailmiö tunnetaanpohjamaali dimer.Things tarvitset
Alukesekvenssit
Näytä Enemmän Ohjeet
1
TutkiGC-pitoisuus (lukumäärä G: n ja C : n ) omassa alukesekvenssistä . GC liimaus on vahvempi kuin liimaus koskalisävetyä sidosguaniini- ja sytosiini . Optimaalinen liimaus on vähintään 50 prosenttia GC sisältöä .
2
Tutkipariutumislämpötilaa reaktion . Matala hehkutuslämpötiloja , määritellään yleensä 55 ° C tai sen alapuolella , voivat aiheuttaa ei- spesifinen sitoutuminen aluketta , joka voi aiheuttaa alukedimeereistä lisäksi monistuminen virheellisen genomi- osaan.
3
kahdelle -Sisäänkirjautuminenmäärän ja pitoisuuden alukkeiden voit lisätäPCR . Ylimäärä alukkeet , yleensä yli 75 pikomoolia , voi aiheuttaa alukedimeereistä samoin .